Resumo

Objetivo: Durante o período pós-natal do desenvolvimento projeções retinotectais sofrem um processo de retração e eliminação de axônios, essencial para a correta representação do campo visual nos núcleos visuais centrais. Metaloproteases (MMPs) são uma família de enzimas que degradam a maior parte das moléculas de matriz extracelular, possibilitando a inativação de moléculas inibitórias ao crescimento axonal, e participam ainda de regeneração induzida por lesão no sistema nervoso central. MMPs são endogenamente reguladas pela família das TIMPs (-1,-2,-3,-4) e o equilíbrio na expressão dessas moléculas durante o desenvolvimento é fator determinante para a formação da topografia de circuitos neurais. Resultados prévios do nosso laboratório apontam uma redução da expressão e atividade da MMP-9 durante o desenvolvimento, e um aumento após enucleação monocular induzida em P10. Nosso objetivo foi o de estudar a modulação da plasticidade mediada pela MMP-9 na presença de SB-3CT, seu inibidor específico, dentro do período de P0-P7 e na indução de enucleação monocular em P10. Métodos: Ratos da linhagem Lister Hooded em diferentes idades pós-natais foram profundamente anestesiados e tiveram os colículos superiores removidos e submetidos a análise zimográfica e western blotting. Adicionalmente, um grupo de animais foi perfundido com solução salina 0.9%, seguido por aldeídos, e então os cérebros foram removidos e mantidos em solução sacarose por 24 h. Secções coronais de 20m foram obtidas no criostato. Estas então foram recolhidas em tampão fosfato 0.1M, transferidas para tampão acetato 0.1M e incubadas em TMB e H2O2. Os cortes foram analisados em um microscópio Zeiss. Resultados: Nosso grupo observou através do western blotting uma modulação da expressão das TIMPs-1,-2 e -3 durante o desenvolvimento. Quando tratados com SB-3CT observou-se, em análise de microscopia, uma marcação difusa das projeções retinotectais no colículo superior de ratos P7 em relação aos controles (veiculados com DMSO). Além disso, o SB-3CT foi capaz de modular a plasticidade durante a sobrevida pós-enucleação monocular. Análises zimográficas mostraram que há uma redução da atividade da MMP-9 durante tais períodos, reforçando os resultados morfológicos. Conclusões: Os resultados sugerem que as MMPs desempenham um importante papel no refinamento das conexões da via retinotectal bem como na plasticidade pós-enucleação monocular. Além disso, em condições fisiológicas, durante o desenvolvimento, as TIMPs são de grande importância na modulação endógena da atividade das MMPs.