SBNeC 2010
Resumo:H.007


Poster (Painel)
H.007Modificação do método de Golgi do tipo “single-section” para encéfalo de peixes
Autores:Liliam Midori Ide (UFSJ - Universidade Federal de São João del-ReiUSP - Universidade de São Paulo) ; Augusto Barbosa Júnior (USP - Universidade de São Paulo) ; Janaína Brusco (USP - Universidade de São Paulo) ; Anette Hoffmann (USP - Universidade de São Paulo) ; Jorge Eduardo Moreira (USP - Universidade de São Paulo)

Resumo

O método de Golgi é um procedimento antigo e confiável ainda em uso para analisar a morfologia geral de neurônios e células gliais em diferentes áreas do sistema nervoso de diferentes espécies. A variante “single-section” do método de Golgi proposto por Gabbott e Somogyi (1984) e modificado por Izzo, Graybiel e Bolam (1987) tem a vantagem de reproduzir resultados quando aplicados em cérebros de ratos, gatos, furões e humanos. Usamos este método no teleósteo sul-americano piauçu (Leporinus macrocephalus, Osteichthyes, Anostomidae; Spix, 1829). Animais juvenis com comprimento padrão de 10-12,5 cm foram profundamente anestesiados em solução de tricaína metano sulfonato (MS222) e perfundidos por via transcardíaca com solução isotônica para peixes seguido de paraformaldeído a 4% e glutaraldeído a 1% em tampão cacodilato de sódio 0,1 M (CBS). O encéfalo foi removido da caixa craniana e mantido por no máximo 24 horas na solução fixadora e depois em solução de sacarose a 7% em CBS, por pelo menos dois dias. Cada encéfalo foi submetido à secção coronal de 100 a 200µm de espessura em vibrátomo e os cortes imersos em tetróxido de ósmio a 0,5% e mantidos em dicromato de potássio a 3,5% por 24h. Os cortes foram prensados entre lâminas histológicas e mantidos em nitrato de prata a 1,5%, permanecendo no escuro por 24-48h. Após esta etapa, os cortes foram lavados em água destilada, desidratados, diafanizados, montados em lâminas e cobertos com meios de montagem e lamínulas. Com este procedimento, as células gliais e os neurônios, com suas extensões e espinhos dendríticos, puderam ser identificados para posterior análise qualitativa e quantitativa com microscopia de luz. Assim, este método é útil para estudar o encéfalo de peixes com as mesmas vantagens descritas para o método de Golgi do tipo “single-section”.


Palavras-chave:  método de Golgi, microscópio de luz, encéfalo de peixes, Leporinus macrocephalus