Resumo

A vitamina B1 (tiamina) após ser captada pelos tecidos, pode ser fosforilada dando origem à diversas formas, entre elas a tiamina pirofosfato (TPP) que atua como cofator de enzimas chaves no metabolismo energético celular. A deficiência de tiamina (DT) leva a perdas celulares em várias regiões do encéfalo, incluindo o tálamo. Entretanto, os mecanismos moleculares responsáveis pelas lesões cerebrais continuam obscuros. Tanto em modelos experimentais como em seres humanos, episódios de DT causam, entre outros efeitos, hipoatividade motora e prejuízos cognitivos. O presente estudo tem como objetivos avaliar os efeitos da deficiência crônica de tiamina em animais adultos, sobre: (i) o desempenho em tarefas de aprendizagem e memória espacial e (ii) o perfil da expressão protéica no tálamo. Trinta e dois ratos machos, adultos, divididos em dois subgrupos, de acordo com o tratamento, foram utilizados: I- Controle (C, n = 16): animais tratados com ração padrão e injeções diárias de salina e, II- Deficiente em Tiamina (DT, n = 16): animais tratados com ração deficiente em tiamina e injeções diárias de piritiamina, um inibidor da enzima responsável pela produção da TPP. As alterações cognitivas foram analisadas utilizando-se o Labirinto Aquático de Morris e a expressão protéica por eletroforese bidimensional utilizando tiras de gel com gradiente de pH, imobilizado de 3 a 11, não linear, de 7 cm. Amostras provenientes dos animais dos dois grupos (n=4, cada) foram aleatoriamente utilizadas para separação e identificação de proteínas do tálamo. Os géis foram analisados utilizando o programa Image MasterTM 2D Platinum. Análise de variância, com medida repetida no último elemento, mostrou um efeito significativo (p < 0,05) da deficiência de tiamina na aquisição da tarefa de navegação espacial. Contudo, apesar da diferença na velocidade de aprendizado, os animais deficientes ainda foram capazes de aprender a tarefa de forma similar aos controles. Com relação aos mapas protéicos, cerca de 320 spots de proteínas foram detectados (Coomassie G-250), no perfil médio, gerado com as amostras do tálamo obtidas de animais de cada um dos dois grupos experimentais. Análises quantitativas mostram que sete proteínas apresentam expressão alterada (p< 0,05) com relação ao controle. Os dados sugerem que o processo de neurodegeneração, induzido por deficiência grave de tiamina, envolve alterações no perfil de proteínas do tálamo, tanto no sentido de aumentar quanto diminuir a expressão de algumas dessas moléculas. O próximo passo será a identificação e caracterização dessas proteínas por espectrometria de massa.