Pr�mio
B.037 | A atividade da fosfatase calcineurina regula a forma��o do neuromodulador D-serina em neur�nios | Autores: | Mariana Rocha Amarante Corr�a (UFRJ - Universidade Federal do Rio de JaneiroUFF - Universidade Federal Fluminense) ; Marcelle Guimar�es de Oliveira (UFRJ - Universidade Federal do Rio de JaneiroUFF - Universidade Federal Fluminense) ; Caroline Madeira Moreira (UFRJ - Universidade Federal do Rio de Janeiro) ; Charles Vargas Lopes (UFRJ - Universidade Federal do Rio de Janeiro) ; Rog�rio Arena Panizzutti (UFRJ - Universidade Federal do Rio de Janeiro) |
Resumo Introdu��o
A D-serina � um co-agonista end�geno dos receptores de glutamato do tipo NMDA, que participa da comunica��o celular no sistema nervoso. A enzima serina racemase (SR) forma D-serina a partir de L-serina. A prote�na que interage com PKC-1 (PICK1) � capaz de se ligar � SR e regular os n�veis de D-serina. Observamos previamente que a PKC fosforila a SR e reduz a disponibilidade de D-serina no sistema nervoso in vivo. A calcineurina � uma fosfatase que defosforila prote�nas fosforiladas pela PKC.
Objetivo
Estudar o papel da fosfatase calcineurina no controle da fosforila��o da SR e dos n�veis de D-serina.
Metodologia
Estudamos culturas prim�rias de neur�nios do c�rtex de embri�es Wistar com 14 dias. Tais culturas foram tratadas com L-serina para estimular a produ��o de D-serina. A fosforila��o da SR foi medida por imunodetec��o e os n�veis de D-serina foram monitorados por cromatografia de alta performance (HPLC).
Resultados
Primeiro observamos que a inibi��o inespec�fica de fosfatases pelo �cido ocad�ico reduz de forma significativa os n�veis de D-serina em neur�nios (n=3; P=0,001; t=3,94). Para estudar o papel espec�fico da calcineurina inibimos seletivamente a calcineurina com ciclosporina A. Observamos que a inibi��o espec�fica da calcineurina reduziu significativamente a concentra��o de D-serina nos neur�nios (n=3; P=0,03; t=2,24) e aumentou em torno de 60% a fosforila��o da SR em res�duos de serina (n=3; P=0,006; t=4,07).
Conclus�o
Os resultados mostram que a atividade da calcineurina regula o estado de fosforila��o da SR e a forma��o de D-serina em neur�nios. Os pr�ximos passos incluem estudar o papel da calcineurina na regula��o da SR em astr�citos e in vivo.
Palavras-chave: calcineurina, d-serina, neur�nio, NMDA, serina racemase |