Resumo

OBJETIVOS: Calcineurina (CaN) é uma fosfatase dependente de cálcio comumente relacionada a fenômenos de plasticidade sináptica, especialmente à indução da depressão de longa duração (LTD). Recentes trabalhos na literatura correlacionam alterações na atividade sináptica com o estabelecimento e manutenção de conexões no sistema nervoso central. Nesse contexto, procuramos avaliar o papel da calcineurina e de elementos relacionados a estabilização sináptica durante e após o período crítico de desenvolvimento da via retinotectal. MÉTODOS: Através de western blot avaliamos o conteúdo total da CaN no colículo superior de ratos Lister Hooded ao longo do desenvolvimento pós-natal. Também mapeamos os terminais ipsolaterais retinotectais através do transporte anterógrado de peroxidase após a administração intracraniana dos inibidores da CaN, CsA (1mM) e CIP (285μM), ou DMSO (veículo) via ELVAX em DPN7. Os animais tiveram sobrevidas de 24h, 7 dias e 28 dias após as cirurgias. Também através de western blot verificamos o conteúdo total da isoforma fosforilada do CREB (pCREB) e ZENK ao longo do desenvolvimento pós-natal e após inibição local de CaN via ELVAX após 1, 3, 6 ou 12h de sobrevida. RESULTADOS: No 14º dia pós-natal (DPN14) detectamos um aumento transitório no conteúdo de CaN. A análise qualitativa do transporte anterógrado de peroxidase mostrou que após 24h ou 1 semana de sobrevida, o bloqueio da CaN promoveu uma intensa expansão da área de marcação terminal ipsolateral por toda a superfície das camadas visuais do colículo superior em relação aos grupos controle. Tal efeito é revertido após 4 semanas de sobrevida. Encontramos maior conteúdo de pCREB durante as 2 primeiras semanas pós-natal. Após 3 ou 6h de administração local de CsA, encontramos um aumento nos níveis de pCREB em relação ao grupo controle. O conteúdo de ZENK aumentou gradativamente ao longo do desenvolvimento pós-natal até o 4º mês. Após 3, 6 ou 12h de administração local de CsA, encontramos um aumento nos níveis de ZENK em relação ao grupo controle. CONCLUSÕES: Em conjunto, nossos resultados sugerem um papel da CaN no refinamento de mapas retinotectais durante e após o período crítico do desenvolvimento. O aumento da área de marcação terminal após o bloqueio da CaN pode ser resultado de uma facilitação da estabilização de novas terminações axonais topograficamente não-relacionadas, sugerindo a existência de uma plasticidade latente na via retinotectal. É possível que esta plasticidade seja resultado de uma reorganização dos terminais retinianos em conjunto com um processo neuritogênico. Tais modificações na topografia aparentam ser dependentes da inibição permanente da CaN, uma vez que após 4 semanas de sobrevida pós-implante a liberação dos inibidores pelo ELVAX deve apresentar redução em relação aos primeiros dias pós-implante. Isto sugere que a CaN é importante na manutenção das conexões topograficamente organizadas mesmo após o período crítico. Além disso, o aumento do conteúdo de pCREB e ZENK após a liberação local de CsA fortalecem a hipótese de estabilização de sinapses inapropriadas uma vez que o primeiro é alvo indireto da CaN e ambos são freqüentemente associados a plasticidade sináptica. Apoio Financeiro: CNPq, CAPES, FAPERJ e PRONEX-MCT